Manutenção celular de comunidade sintética contendo cinco estirpes de bactérias promotoras de crescimento em substrato sólido

Resumo

Visando obter um produto contendo uma comunidade sintética (CS) de bactérias promotoras de crescimento e com ação de biocontrole em cana-de-açúcar, substratos sólidos foram selecionados de forma a permitir a manutenção celular dos seus componentes. Para isto, cinco estirpes foram utilizadas: quatro Gram-negativas e diazotróficas Gluconacetobacter diazotrophicus (Gd-BR11281), Herbaspirillum seropedicae (Hs-BR11335), Paraburkholderia tropica (Pt-BR11366) e Nitrospirillum amazonense (Na-BR11145) e uma bactéria Gram-positiva, o Bacillus velezensis Bv- LMC44a; não fixadora. Os substratos avaliados foram: fibra de coco, bagaço de cana, turfa e vermiculita esterilizados por autoclavagem e acondicionados em sacos plásticos de poliestireno. Após a inoculação das diferentes estirpes cultivadas em meio líquido BPSc, as mesmas foram mantidas em câmara resfriada à 18^oC. Para monitoramento da população celular ao decorrer do tempo de estocagem foram utilizados dois métodos de contagem: espalhamento usando meio SYP em placa e contagem e pelo método do número mais provável, utilizando meios de cultivo semissólido, sem N (LGI-P, LGI, JNFb) para as diazotróficas. A contagem foi realizada em intervalos de 30, 60 e 90 dias após a inoculação. A avaliação populacional mostrou que das cinco estirpes, a mais sensível à estocagem foi Gd-BR11281. O substrato baseado em bagaço manteve a população estável.  Na segunda etapa do desenvolvimento o substrato utilizando a mistura de fibra de coco e bagaço de cana 70/30 (v/v) foi testado. A população de GD-BR11281 manteve números acima de 10⁸ com 30 dias de incubação, reduzindo 10 vezes aos 93 dias. O pH final se manteve entre 5,21em 5,69 nas duas avaliações.  Estes resultados indicam que o substrato selecionado foi capaz de manter a população ideal por pelo menos 30 dias.  Ajustes podem aumentar o tempo de prateleira desta estirpe e atingir as condições ideais para ser usado como um inoculante imobilizado em um substrato leve, facilmente encontrado no país e de baixo custo.